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BookmarkBlue Genes
Die Komponenten
Die CD-ROM
Die CD-ROM zum "Blue Genes" -Genbaukasten soll begleitend die Hintergründe und theoretischen Grundlagen zu den einzelnen Komponenten und Versuchsteilen vermitteln und zum anderen einen detaillierten Ablauf der ersten beiden Versuche und deren Auswertung darstellen. Jedem Koffer liegt eine CD-ROM bei.
Sie enthält:
Allgemeine Hintergründe
- Allgemeine Vorsichtsmaßnahmen und Entsorgung
- Steriles Arbeiten
- Wichtige Hinweise
Informationen zu den Praktikumsversuchen
- Bestandteile des Kits
- Theoretische Grundlagen
- 1. Analyse von DNA (2-tägiger Versuch)
- 2. Klonierung von DNA (4-tägiger Versuch)
Anhänge und Arbeitsblätter
- Adressen
- Glossar
- 21 ausdruckbare Arbeitsblätter
Der Koffer
Im "Blue Genes"-Koffer befinden sich alle Geräte und Materialien sowie jene Chemikalien die, bei Raumtemperatur gelagert werden können und über einen längeren Zeitraum stabil sind.
Bestelladresse s. Nachbestellungen
- Netzgerät PowerPac 300 mit einer ausführliche Bedienungsanleitung des Herstellers
- Elektrophoresekammer mit Zubehör und Bedienungsanleitung
- Variable Mikropipette, 2 – 20 µl mit Bedienungsanleitung
- Pipettenspitzen, steril, 96 Stück, gesteckt
- Pipettenspitzen, 300 Stück, im Beutel
- Einwegpipetten, steril, 30 Stück
- Petrischalen, steril, 20 Stück, Ø 60 mm
- 1,5 ml Reaktionsgefäße, steril, 100 Stück, in fünf Farben
- Ständer für Reaktionsgefäße, Schaumstoff-Stanzteile, vier Stück
- LB-Agar-Pulver, 18 g
- DNA-Auftragspuffer, 500 µl
- TBE Elektrophoresepuffer, 10fach konzentriert, 500 ml
- Agarose, 25 g
- Abfallbeutel, fünf Stück
- Plastikschälchen, zwei Stück
Die
Reagenzienbox
In der "Blue Genes" -Reagenzienbox befinden sich alle Komponenten, die bei –20 °C gelagert werden müssen. Hierzu eignet sich das ***-Gefrierfach eines Kühlschranks.
Die Reagenzien sind ausreichend, um den Versuchsteil 1 "Analyse von DNA" mit zwölf Gruppen und den Versuchsteil 2 "Klonierung von DNA" mit vier bis fünf Gruppen durchzuführen.
Bestelladresse s. Nachbestellungen
- Restriktionsenzym Bam H I
- Restriktionsenzym Ban II
- Restriktionsenzym Hin d III
- Puffer B für Bam H I, Ban II, Hin d III pH 8,0 (37 °C) 10fach konzentriert
- T4 DNA-Ligase
- Puffer für T4 DNA-Ligase pH 7,5 (20 °C) 10fach konzentriert
- Plasmid-DNA, pUCD
- DNA-Marker III
- Ampicillin
- lacZ-Gen, Bam H I / Hin d III-Fragment
- pUCD lac Z
- IPTG
- X-Gal Lösung in DMSO (Dimethylsulfoxid)
- Steriles Wasser
- AzurB-Chlorid (Trimethylthioninchlorid) (500fach konzentriert**)
- LB-Medium (Luria Bertani)
Die kompetenten Bakterienzellen
E. coli K12 (JM109)
Bestelladresse s. Nachbestellungen
Die kompetenten Bakterien behalten nur ihre Fähigkeit DNA aufzunehmen, wenn diese bei -80 °C gelagert werden. Die Bakterien werden daher auf Trockeneis (-80 °C) geliefert und müssen bis zum Gebrauch darin aufbewahrt werden. Die Experimente sollten so geplant werden, daß die Zellen nur kurzfristig (max. 2 Tage) bei Ihnen in der Schule gelagert werden müssen.
Bei den in diesen Praktikumsversuchen verwendeten Bakterien handelt es sich um den Escherichia coli Sicherheitsstamm K12 , der weder den menschlichen Darm besiedeln, noch außerhalb der im Experiment gebotenen Bedingungen leben kann. Dem K12 Sicherheitsstamm fehlen mehrere essentielle Eigenschaften, die Sie auch der Aufstellung auf Seite 90 in der beiliegenden CD-ROM entnehmen können.
Für die Nachbestellung kompetenter Bakterien für weitere Versuche mit dem "Blue Genes"-Genbaukasten wenden Sie sich bitte an die Promega GmbH.
