Geräte

COBAS® TaqMan® 48 Instrument

COBAS® TaqMan® 48 ist ein kompaktes Tischgerät, das aufgrund innovativer Real-Time PCR-Technologie manuelle Schritte reduziert und Analysezeiten verkürzt. Amplifikation und Real-Time Detektion erfolgen im selben geschlossenen Reaktionsgefäß im COBAS® TaqMan® 48 Instrument. Mit zwei unabhängigen Thermocyclern können je nach Bedarf auch unterschiedliche Parameter parallel bearbeitet werden.

Der PCR-Mastermix enthält neben den spezifischen Primern auch Hydrolysesonden, die mit den PCR-Produkten hybridisieren. Hydrolysesonden sind mit zwei Fluorochromen beladen, die bei intakter Sonde kein Messsignal abgeben. Erst wenn im nächsten PCR-Zyklus die DNS-Polymerase auf die Sonde trifft und sie durch Hydrolyse degradiert, werden die beiden Fluorochrome räumlich getrennt und ein messbares Fluoreszenzsignal emittiert. Im COBAS® TaqMan® 48 Instrument wird dieses Lichtsignal erfasst und an eine Datenstation weitergeleitet, wo mithilfe der AMPLILINK Software die zum Fluoreszenzsignal proportionalen Mengen an PCR-Produkten errechnet wird. Mit dieser Hydrolyse-Sonden-Technologie erreichen die COBAS® TaqMan® 48 Tests einen breiten linearen Messbereich bei gleichzeitig hoher Sensitivität.

COBAS® AMPLICOR® Instrument

Für das COBAS® AMPLICOR® System steht ein breites Spektrum an COBAS® AMPLICOR® Tests zur Verfügung. Als erstes PCR-System, das Amplifikation und Detektion vollautomatisch durchführt, ermöglicht das COBAS® AMPLICOR® System einen effizienten Arbeitsablauf im PCR-Routinelabor. Die Ergebnisse von bis zu 24 Proben können dabei parallel in zwei unabhängigen Thermocyclern qualitativ oder quantitativ bestimmt werden.

Amplifikation und Detektion werden in zwei Schritten nacheinander durchgeführt:

Nach der PCR mit Biotin-gelabelten Primern erfolgt eine letzte Denaturierung der Amplifikate. Diese hybridisieren mit spezifischen Detektionssonden, die an magnetische Beads gebunden sind. Ein Magnet hält die Hybride aus Amplifikat und Sonde nun im Reaktionsröhrchen fest, während alle anderen Bestandteile der PCR (Primer, Salze, etc.) in den Waschschritten entfernt werden.

Das hinzugefügte Avidin-Meerrettich-Peroxidase-Konjugat bindet an das Biotin der Amplifikate und setzt das Substrat Tetramethylbenzidin in blaue Farbpräzipitate um.

Abschließend erfolgt die kolorimerische Messung im Photometer des COBAS® AMPLICOR® Systems.